 HPLC-Tipp | HPLC-Tipp, 12-2011Ode an zwei Liebende
Nehmen wir mal folgendes „Liebespaar“ an: „Sie“ ist klein, schlank und hat´s von Natur aus eilig. „Er“ dagegen ist je nach Situation langsam, recht unberechenbar, aber auch sehr experimentierfreudig. | HPLC-Tipp, 11-2011Eine Differenz von 0,1…0,5 % im Lösungsmittel – wie kritisch ist es?
Der Fall
Als HPLC-Anwender weiß man, dass die präzise Herstellung von Eluent und Probenlösung eine elementare Grundvoraussetzung für reproduzierbare Ergebnisse ist. | HPLC-Tipp, 10-2011Was gibt es Neues aus dem Säulenmarkt zu berichten?
Der Fall
Auch nach ca. 40 Jahren kommerziell erhältlicher HPLC-Säulen werden fortan neue stationäre Phasen eingeführt – und dies mit ungebremster Intensität. | HPLC-Tipp, 09-2011Schnellexperimente zur Verbesserung der Peakform und/oder der Auflösung
Der Fall
Sie befinden sich gegen Ende Ihrer Optimierungsbemühungen: Sie haben eine neue Methode entwickelt oder eine bestehende verbessert. | HPLC-Tipp, 08-2011Die "Kleinen" im Sommer
Wir haben an dieser Stelle uns des Öfteren über die Injektion unterhalten, aber: Diese Story ist eine unendliche… Heute möchte ich auf Probleme mit der Reproduzierbarkeit eingehen und auf einige Sachen hinweisen, die man im Alltag vielleicht bedenken sollte. | HPLC-Tipp, 07-2011Die lieben Amerikaner…
Amerikaner mag ich – meistens jedenfalls. Denk- und Handlungsweise sind leicht nachvollziehbar, jene rational zu belegen nicht immer einfach. Wie auch immer, Manches ist nun so wie es ist, man muss es nur wissen und es akzeptieren. Es gilt die Konsequenzen zu ziehen und Vorsicht walten zu lassen. Wir sind bei den „Kleinen“, deswegen beschränke ich mich hier auf einige mögliche Missverständnisse und Fallstricke in äußerst knapper Form. Ich habe solche gewählt, die sowohl die analytische Praxis als auch das analytische Verständnis im Allgemeinen adressieren: | HPLC-Tipp im Juni, 06-2011Die „Kleinen“ im Sommer
Ganz plötzlich ist der Sommer wieder da. Also werden wir uns in den Monaten Juni, Juli, August in der LABO wieder mit kleineren, aber nichts desto weniger überaus nützlichen HPLC-Tipps beschäftigen. | HPLC-Tipp, 05-2011Bild 3: Reduktion des Flusses auf F = 0,8 ml/min. Die Vorsäule – nicht nur als „Vorsäule“ zu nutzen…
Der Fall Mit einigen Anwendern habe ich vor Ort ein paar einfache Optimierungsexperimente durchgeführt. Wir haben einiges ausprobiert, nachfolgend werden ein, zwei Ergebnisse vorgestellt. | HPLC-Tipp, 04-2011„Slit“, „Bandwidth“ und Referenzwellenlänge beim Diodenarray – Einstellungen und Effekte Der Fall
Die oben genannten Einstellparameter beeinflussen die Integration – und somit die Peakfläche –, aber auch die Streuung der Werte bei Wiederholmessungen (siehe dazu HPLC-Tipp vom September 2010). | Der HPLC-Tipp, 03-2011Bild 1: Zu Mittelwerten und Variationskoeffizienten von drei Messreihe... Der Fall
In der Analytik werden zum Vergleich von Zahlenreihen nahezu ausschließlich der Mittelwert und die rel. Standardabweichung (Variationskoeffizient, Vk) herangezogen. Entsprechen diese zwei Zahlen den Anforderungen, wird alles als bestens erachtet. Dies kann sich jedoch als Trugschluss erweisen, in der Routine kann es dennoch zu Problemen kommen. Zweifel kommen auf, ob denn diese Kriterien vielleicht doch nicht ausreichen… Das kann in der Tat so sein, schauen wir uns nachfolgend einen möglichen Grund an. | HPLC-Tipp, 01-02-2011Der Fall: In letzter Zeit machen die Sub-2-µm-Teilchen sowie die Fused Core Materials von sich reden.
So wird gerne auf die hohen Bodenzahlen dieser Materialien hingewiesen und folglich auf die damit verbundene wesentlich bessere Trennung. | HPLC-Tipp, 12-2010Liebe Anwenderinnen, liebe Anwender,
es ist eine Weile her, dass wir von den zwei Peaks, Peaky und Chromy, etwas gehört haben. Heute jedoch sind die zwei recht ungleichen Freunde wieder beisammen: Zum Einen der kleine Peaky Säure aus Polarweiler, wie eh und je quirlig, ungeduldig, frech und mit einem für ihn typisch losen Mundwerk, welches man ihm leider nicht mehr abgewöhnen kann. | HPLC-Tipp, 11-2010Bild 2: Einfluss des Verweilvolumens einer Gradientenanlage auf die An... Der Fall:
Im Zuge der Verbreiterung von U(H)PLC-Geräten warten die Hersteller mit immer kleineren Verweilvolumina (Verweilvolumen, auch: Verzögerungsvolumen, „Delay Volume“, „Dwell Volume“, das ist das Volumen von der Mischkammer bis zur Säule) bzw. | HPLC-Tipp, 10-2010Der Fall:
Dass Geräte von unterschiedlichen Herstellern große Unterschiede aufweisen können, ist eine HPLC-Binsenweisheit. Der Unterschied kann im Verweilvolumen bei Gradientenanlagen liegen (Hochdruck vs. | HPLC-Tipp, 09-2010Bild 3: Abhängigkeit des Variationskoeffizienten von der Retentionszei... Der Fall:
Einstellparameter wie Zeitkonstante („response time“, „time constant“), Peakwidth, Datenrateaufnahme („sample rate“), Bandwidth etc. können die Integration und somit Peakfläche und Befund stark beeinflussen. | HPLC-Tipp, 07-08-2010Zum Effekt des Filtrierens von ACN-Eluenten (Details siehe Text). 1. Von „Gebirgen“ in der Basislinie und von Läufen im Sommer und im Winter im Falle von ACN/Wasser-Eluenten
Der Fall:
Sagen wir, Ihnen ist aufgefallen, dass Sie im Sommer mit ACN/Wasser- bzw. | HPLC-Tipp, 06-2010Liebe Anwenderinnen, liebe Anwender,
Die Kleinen im Sommer – gemäß dieser Tradition werden Sie in den Monaten Juni, Juli/August an dieser Stelle kurze, „knackige“ HPLC-Tipps vorfinden. | HPLC-Tipp, 05-2010Der Fall:
In der Routine werden AnwenderInnen immer wieder mit folgender Situation konfrontiert: Die Lebensdauer manch einer Säule lässt zu wünschen übrig. | HPLC-Tipp, 04-2010Der Fall:
Kieselgel ist ein sehr guter Feststoffkatalysator, es wird vielfach in der chemischen Industrie eingesetzt. In der RP-Chromatographie nun, wo ja Kieselgel die mit Abstand wichtigste Matrix darstellt, führt seine Umsetzung mit Silanen aufgrund von sterischen Effekten zu einem Umsetzungsgrad von lediglich rund 50. | HPLC-Tipp, 03-2010Bild 3: Verbinden der markierten Punkte zum Zeichnen der Basislinie. Der Fall:
Bei Gradiententrennungen oder im Falle von Matrix-belasteten Proben müssen oft Peaks, die sich auf einer mehr oder weniger stark driftenden Basislinie oder auf einem flachen „Buckel“ befinden, integriert werden. |
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