Labo Online - Analytic, Labortechnik, Life Sciences
Home> Labor-Tipps> HPLC-Tipp> Tipps rund um den Eluenten

HPLC-TippTipps rund um den Eluenten


Liebe Anwenderinnen, liebe Anwender,

Die Kleinen im Sommer – gemäß dieser Tradition werden Sie in den Monaten Juni, Juli/August an dieser Stelle kurze, „knackige“ HPLC-Tipps vorfinden. Wir beginnen heute mit Tipps rund um den Eluenten.

  • Es hat sich gezeigt, dass im Falle von ternären Mischungen bei bestimmten Mischverhältnissen die Dichtungen „streiken“, z.B: Eine Mischung 25/25/50 MeOH/ACN/Wasser führt zu Leckagen, nach dem Wechsel jedoch zu einer Mischung 10/40/50 MeOH/ACN/Wasser ist wieder alles im Lot.
  • Die Peakform von basischen Analyten lässt manchmal auch bei Verwendung von modernen stationären Phasen zu wünschen übrig. Durch eine Erhöhung der Ionenkonzentration im Eluenten wird die Peaksymmetrie besser, man möchte allerdings nicht unbedingt die Pufferstärke verändern, was ja auch eine Erhöhung der Ionenkonzentration bedeuten würde. Man könnte nun Folgendes tun: Zum Wasser (oder zum Puffer) werden ca. 2 g/l KCl zugesetzt, es wird dadurch häufig eine Verbesserung der Peaksymmetrie beobachtet.
  • An dieser Stelle haben wir uns bereits darüber unterhalten, dass nach der Zugabe des organischen Anteils zum Eluenten der vorher eingestellte pH-Wert verschoben wird. Diese Verschiebung bzw. der resultierende End-pH-Wert kann auch von der Art des Ansetzens der mobilen Phase abhängig sein, z.B. Variante 1: Puffer plus ACN plus anschließend MeOH, es ergibt sich der pH-Wert 1.
Anzeige

Variante 2: ACN und MeOH werden zusammen zum Puffer dazugegeben, es ergibt sich der pH-Wert 2.

Dies ist ein weiteres Beispiel dafür, dass in den Prüfvorschriften das Ansetzen des Eluenten möglichst genau beschrieben werden sollte.

  • Eluenten werden manchmal filtriert. Wenn sich nun im Eluenten geringe Mengen an Modifier befinden, kann es vorkommen, dass jene am Filtermaterial teilweise sorbiert werden. Das Ergebnis kann nicht nur eine mögliche leichte Verschiebung der Retentionszeit sein, sondern eine Änderung der Peakfläche. Beispiel: Bei einem Eluenten mit 0,1% SDS wurde stets eine Instabilität der Peakfläche beobachtet. Der Wechsel zu 1% SDS löste das Problem. Man sollte bei Bedarf überprüfen, ob durch eine geringe Veränderung eines Parameters (dazu gehört z.B. auch die Wellenlänge) und bei weiterhin konstantem chromatographischen Ergebnis die Robustheit/Reproduzierbarkeit verbessert werden kann.
    © by Stavros Kromidas
    www.kromidas.de
Anzeige

Weitere Beiträge in dieser Rubrik

Dr. Stavros Kromidas

HPLC-TippPetra im HPLC-Labor – kurz vor Weihnachten 2027

Liebe Leserinnen, liebe Leser, manches ist heute schon möglich, das Internet der Dinge wird auch die Analytik erobern. Intelligente, umfassende Vernetzung von Geräten und die Analyse von Big Data kann die Analytik von morgen gänzlich anders aussehen lassen.

…mehr
Agilent 1290 mit SFC-Modul

HPLC-TippSFC – die richtige Anlage

Der Anwender ist davon überzeugt, dass SFC in seinem Laborbereich unbedingt zum Einsatz kommen soll. Budget ist vorhanden und der Anwender hat die Qual der Wahl, welche Anlage angeschafft werden soll.

…mehr
HPLC-Tipp: Ärger mit den Fritten

HPLC-TippÄrger mit den Fritten

Unerklärliche Druckschwankungen in einem Pumpensystem, die aber nur auftreten, wenn Wasser gefördert wird. Der Kanal mit Acetonitril oder einem ähnlichen Laufmittel arbeitet völlig einwandfrei, so dass ein Fehler an der Pumpe ausgeschlossen werden kann.

…mehr
Römerhelme

HPLC-TippÜbernahme einer Methode in die Routine, Formulierungen in PV´s…

Liebe HPLC-Anwender, wir haben im letzten Jahr beschlossen, den September als Sommermonat zu definieren. Übrigens: Ursprünglich galt er bei den Römern in der Tat als der siebte Monat (septem = sieben) und ein siebter Monat ist ein Sommermonat – „fertig“.

…mehr
Dr. Stavros Kromidas

HPLC-TippRund um DAD- und MS-relevante Themen

Zunächst einige Hinweise zur LC/MS-Kopplung: Bekanntlich ist TFA (Trifluoressigsäure) ein häufiges, gern verwendetes Additiv – nicht nur in der LC/MS-Kopplung.

…mehr
Anzeige

Bildergalerien bei LABO online

Anzeige

Jetzt den LABO Newsletter abonnieren

LABO Newsletter abonnieren

Der kostenlose LABO Newsletter informiert Sie wöchentlich über neue Produkte, Lösungen, Technologietrends und Innovationen aus der Branche sowie Unternehmensnachrichten und Personalmeldungen.

Anzeige
Anzeige

Mediaberatung