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HPLC-Tipp

HPLC-Tipp

Der HPLC-Tipp

Wieso ist der pH-Wert so wichtig, was bewirkt er eigentlich?

Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

Der Fall

Alle diejenigen, die mit polaren/ionischen bzw. ionisierbaren Analyten zu tun haben, wissen, dass der pH-Wert des Eluenten ein sehr wichtiger Faktor ist.

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Der HPLC-Tipp

Säulendimensionen und Gradiententrennungen

Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

Der Fall

Wir haben uns bereits im August über Säulendimensionierung bei Gradiententrennungen unterhalten. Meine häufige Diskussionen mit KollegInnen an der ,,Front" veranlassen mich jedoch erneut das Thema aufzugreifen.

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    Der HPLC-Tipp

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    Der HPLC-Tipp

HPLC-Tipp

Der HPLC-Tipp

Muss es eigentlich immer HPL,,C" sein?

Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken 

Manche(r) sagt sich: ,,Was soll das für eine dämliche Frage und zwar in einer HPLC-Columne?". Na ja, schauen wir mal.

Der Fall

Sie betreiben Gehaltsbestimmung eines Wirkstoffs, beispielsweise aus einer Tablette oder nach einer Freisetzung.

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HPLC-Tipp

Der HPLC-Tipp

Säulenlänge, Fluss und Retentionszeiten bei Gradienten-Trennungen

Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken 

Der Fall

Hintergrund: Wichtig in der HPLC sind ,,vernünftige" Wechselwirkungen. So heißt es beispielsweise für isokratische Trennungen: Die interessierenden Komponenten sollten mit einem Retentionsfaktor von ca.

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HPLC-Tipp

Der HPLC-Tipp

Überbefund bei Gehaltsbestimmung – eine tückische Ursache

Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

Der Fall

Sie arbeiten mit einem ganz normalen linearen Gradienten und Ihr Ziel ist die Gehaltsbestimmung von mehreren Peaks.

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Der HPLC-Tipp

Trennung von isomeren Verbindungen

Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

Der Fall

Die Trennung von isomeren Verbindungen kann sich als ein recht schwieriges Trennproblem erweisen. Das liegt u.a. daran, dass sich die Eigenschaften von Isomeren häufig stark ähneln.

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Der HPLC-Tipp

Tailing in der RP-HPLC Teil 2:  Weitere Ursachen und bewährte Maßnahmen 

Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken 

Der Fall

Tailing ist eines der ärgerlichsten Dinge in der RP-HPLC. Im März haben wir uns mit effektiver Ursachenforschung beschäftigt.

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HPLC-Tipp

Der HPLC-Tipp

Tailing in der RP-HPLC – Teil 1: Schnelle Ursachenforschung

Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

Der Fall

Nehmen wir an, Sie erhalten bei der Injektion einer unbekannten Probe einen tailenden Peak. Die Peakform ähnelt einer der in Bild 1 dargestellten Formen.

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HPLC-Tipp

Der HPLC-Tipp

Schnelle Überprüfung der erzielten Auflösung

Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

Der Fall

Sie befinden sich am Ende einer Methodenentwicklung: Die Peaks machen einen ,,ordentlichen", symmetrischen Eindruck, auch die Auflösung zwischen den Peaks ist zufriedenstellend.

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Der HPLC-Tipp

Selektivität ,,nur" durch unterschiedliche Wechselwirkungen?

Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

Der Fall

Wir haben alle gelernt, dass - außer vielleicht bei der Ausschluss- und Affinitätschromatographie – eine chromatographische Trennung durch unterschiedliche Wechselwirkungen der zu trennenden Analyte mit der stationären Phase zustande kommt.

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HPLC-Tipp

Der HPLC-Tipp

Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

Liebe Leserin, lieber Leser,

Sie wissen, ich finde es nicht so doll, wenn wir uns im Dezember kurz vor Weihnachten über ,,normale" HPLC-Tipps unterhalten. Nehmen wir uns also zum Ausklingen des Jahres etwas anderes vor: Es ist in unserer Zeit Usus, ernst Unseriöses zu erzählen.

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Der HPLC-Tipp

Geisterpeaks beim Blindgradienten

von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

Der Fall

Es ist Usus, vor einem Gradientenlauf einen ,,Blindgradienten" zu fahren. Sollte nun bei diesem Testlauf die Drift auffallend stark sein oder sollten gar ,,Geisterpeaks" erscheinen, besteht Handlungsbedarf, denn: Wir haben es hier mit Kontaminationen zu tun.

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HPLC-Tipp

Der HPLC-Tipp

Schnelle Optimierung einer bestehenden Gradientenmethode

Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

Der Fall

Ich war kürzlich in einem befreundeten Unternehmen, in dem routinemäßig viele Gradientenmethoden laufen.

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Der HPLC-Tipp

von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

 Meine Frau meinte: Kulinarische Urlaubssünden müssen sofort gesühnt werden. Auch im September gibt's bei uns leichte Kost. Ich dachte, das machen wir auch mit den HPLC-Tipps, bevor wir uns im Oktober wieder mit ,,ordentlichen" Tipps beschäftigen.

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HPLC-Tipp

Der HPLC-Tipp

von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

 Führen wir witterungsbedingt unsere ,,nouvelle cuisine" von HPLC-Tipps auch im August fort:

• Polare RP-Phasen, ob nicht-endcappte C18 oder polare ,,embedded phases" oder welche mit kurzen Alkylketten usw.

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Der HPLC-Tipp

Muss es immer Kaliumphosphat sein?

Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

 Der Fall

Der beliebtester Puffer in der RP-Chromatographie ist zweifelsohne Kaliumphosphat – Kaliumdihydrogen – für den sauren, Dikaliumhydrogenphosphat für den neutralen/schwach-alkalischen Bereich.

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Der HPLC-Tipp

Überprüfung der Peakhomogenität – etwas aufwendigere Maßnahmen von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

Der Fall

Im April haben wir uns über schnelle Möglichkeiten zur Überprüfung der Peakhomogenität nach einer erfolgten Trennung unterhalten.

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HPLC-Tipp

Der HPLC-Tipp

Schnelle Überprüfung der Peakhomogenität von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken

Der Fall

Sie sind ans Ende einer Trennungsoptimierung angelangt, Ihre Peaks sehen recht anständig aus. Sie stehen nun vor der Frage: ,,Wie kann ich schnell die Peakhomogenität überprüfen?" ,,Schnell" bedeutet ohne großartige Hardware-Änderung (beispielsweise längere Säule) oder Änderung an der ,,Chemie" (beispielsweise anderer Puffer).

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