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GPC von natürlichen Stärken mit PSS GRAM-Säulen
GPC von natürlichen Stärken mit PSS GRAM-Säulen
Stärken bestehen aus zwei unterschiedlichen Makromolekülen, die sich in Größe und Struktur unterscheiden.
Amylose ist ein schwach verzweigtes, Amylopektin ein hochverzweigtes Polymer mit höherer Molmasse als Amylose.
Die Charakterisierung von natürlichen Stärken ist wegen der großen Anzahl von reaktiven Gruppen in den Ketten, der sehr hohen Molmassen und der komplexen Struktur eine große Herausforderung. Nur eine hierauf abgestimmte GPC-Methode, mit einer optimierten stationären Phase und einer dazu passenden Lösungsmittelpolarität, erlaubt eine wechselwirkungsfreie GPC Analytik.
Probenvorbereitung: Die Proben werden in DMSO für 8 Stunden bei 80°C und danach für 4 Stunden bei 120°C gelöst. Für natürliche Stärken ist die exakte Probenvorbereitung von großer Bedeutung um vollständige Löslichkeit sicherzustellen und gleichzeitig Probenabbau auszuschließen.. Ergebnisse und Fazit:
Die Applikation zeigt die Separation von drei verschiedenen Stärken (Amylopektin, Amylose und Kartoffelstärke) auf PSS GRAM-Säulen (30000Å 10µm 8x300mm + Vorsäule) in DMSO mit LiBr 5g/l (Temperatur: 60°C, Flussrate: 0.5ml/min; Konzentration: 0.5g/l). Die Kalibration mit Pullulan-Standards erlaubt die relative Bestimmung der Molmassen(verteilung).
Mit Hilfe des Lichtstreu-Detektor (PSS SLD7000) wurde die Güte der Probenvorbereitung (Detektion nichtlöslicher Partikel) sowie die Separation der Stärkemoleküle nach dem GPC-Trennmechanismus überprüft.
Durch den Vergleich des LS Signal (molmassensensitiv) mit dem RI Signal (Konzentrationssignal) konnte auch ein Probenabbau ausgeschlossen werden, da das RI-Signal keinen Peak im niedermolekularen Bereich nach dem Hauptpeak aufweist.
Die Abbildung zeigt die Überlagerung von 3 verschiedenen Stärken:
Amylose (blaue Kurve), Amylopektin (rote Kurve) und Kartoffelstärke (grüne Kurve)
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