PreCR-Repair-Mix
PCR auch bei geschädigter DNA
Der neue PreCR™-Repair-Mix von New England Biolabs ist ein Enzym-Cocktail zur Reparatur geschädigter DNA, die nicht mehr durch PCR amplifizierbar ist, wie z.B. forensische DNA-Spuren, DNA aus Herbarien oder fossilen Ursprungs etc. Aber auch anderweitig durch UV-Strahlung oder Hydrolyse geschädigte DNA wird durch die PreCR™-Behandlung „fehlerfrei“ repariert und kann wieder als PCR-Template dienen.
Insbesondere bei DNA-Analysen, für die die Sequenz des Amplifikates von entscheidender Bedeutung ist, kann PreCR™ ein zuverlässiges, genaues Ergebnis sichern: So etwa entstehen durch natürliche Desaminierung desaminierte Cytosin-Reste – d.h. Uracil! Diese U-haltigen DNA-Stränge sind mit Proof-reading-Enzymen nicht amplifizierbar, da das Uracil die Proof-reading-Polymerasen hemmt. Mit Taq-Polymerase hingegen erhält man zwar ein Amplifikat, aber mit einer Mutation: Denn komplementär zum Uracil wird ein Adenin in den zweiten Strang eingebaut. Richtig wäre hier Guanin gewesen. Diese so dauerhaft eingefügte Punktmutation erschwert die Auswertung und Interpretation so mancher Daten!
Laut Herstellerangaben hat übrigens das FBI den PreCR™-Repair-Mix bereits in seinen Laboren getestet und für „gut“ befunden.
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