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PreCR-Repair-MixPCR auch bei geschädigter DNA

Der neue PreCR™-Repair-Mix von New England Biolabs ist ein Enzym-Cocktail zur Reparatur geschädigter DNA, die nicht mehr durch PCR amplifizierbar ist, wie z.B. forensische DNA-Spuren, DNA aus Herbarien oder fossilen Ursprungs etc. Aber auch anderweitig durch UV-Strahlung oder Hydrolyse geschädigte DNA wird durch die PreCR™-Behandlung „fehlerfrei“ repariert und kann wieder als PCR-Template dienen.

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Insbesondere bei DNA-Analysen, für die die Sequenz des Amplifikates von entscheidender Bedeutung ist, kann PreCR™ ein zuverlässiges, genaues Ergebnis sichern: So etwa entstehen durch natürliche Desaminierung desaminierte Cytosin-Reste – d.h. Uracil! Diese U-haltigen DNA-Stränge sind mit Proof-reading-Enzymen nicht amplifizierbar, da das Uracil die Proof-reading-Polymerasen hemmt. Mit Taq-Polymerase hingegen erhält man zwar ein Amplifikat, aber mit einer Mutation: Denn komplementär zum Uracil wird ein Adenin in den zweiten Strang eingebaut. Richtig wäre hier Guanin gewesen. Diese so dauerhaft eingefügte Punktmutation erschwert die Auswertung und Interpretation so mancher Daten!

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Laut Herstellerangaben hat übrigens das FBI den PreCR™-Repair-Mix bereits in seinen Laboren getestet und für „gut“ befunden.

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