Den meisten Menschen ist Taurin ein Begriff im Zusammenhang mit Energydrinks. Doch Taurin (2-Aminoethansulfonsäure) ist nicht nur belebend und anregend, sondern es erfüllt als natürlich vorkommende Verbindung im Körper wichtige Funktionen. Taurin hat zahlreiche physiologische Effekte und ist in seiner Funktion als Neurotransmitter an der Entwicklung des Gehirns und Sehapparats beteiligt. Es wirkt als Antioxidans, schützt den Herzmuskel und hält zahlreiche Organfunktionen aufrecht. Doch die zusätzliche Aufnahme von Taurin sollte bestimmte Mengen nicht überschreiten. Die Höchstmenge von Taurin in verzehrfertigen koffeinhaltigen Getränken liegt für Taurin bei 4 000 mg/l.

Aminosäuren oder andere Substanzen, die eine freie Aminogruppe enthalten, werden oft durch gängige Reagenzien wie ortho-Phthaldialdehyd (OPA), 9-Fluorenyl-methoxycarbonyl-chlorid (FMOC) oder Dansylchlorid derivatisiert, um die zu bestimmenden Analyten in optisch aktive Derivate umzusetzen, die dann empfindlich mit Hilfe von Fluoreszenz- oder UV-Detektoren nachgewiesen werden können. Die Derivatisierung kann entweder vor der Säule (Vorsäulenderivatisierung) oder nach der Auftrennung durch die Säule (Nachsäulenderivatisierung) erfolgen. In beiden Fällen entsteht durch die Derivatisierung ein erheblicher Aufwand. Die Labore in der Getränkeindustrie stehen oft unter erheblichem Zeit- und Kostendruck. Daher wird die Durchführung aufwändiger Probenvorbereitungsschritte vermieden, wenn es möglich ist. Im Folgenden werden Untersuchungen zur direkten Bestimmung von Taurin sowie den Hauptzuckern beschrieben. Hier sind keine zeitintensiven Probenvorbereitungsschritte nötig. Die (kohlensäurefreie) Softdrinkprobe wird direkt in das hier verwendete HPLC-System eingespritzt.

Bild 1: Das System „VWR Hitachi Chromaster“ mit Lichtstreudetektor. © VWR International

Das verwendete HPLC-System (Bild 1) besteht aus einer Pumpe mit quaternärem Niederdruck-Gradientenzubehör sowie eingebautem 6-Kanal-Entgaser. Der Autosampler übernimmt die Probenverdünnung sowie die Injektion der verdünnten Probe auf die Säulen, die sich im Säulenofen befinden. Die Detektion der aufgetrennten Analyten erfolgt direkt mit Hilfe des Lichtstreu-Detektors „VWR ELSD 90“ (ELSD – Evaporative Light Scattering Detector). Komplettiert wird die Anlage durch den Organizer zur Aufnahme der HPLC-Lösungsmittelflaschen sowie das Interface-Controlboard und die OpenLab-HPLC-Steuer- und Auswertesoftware. Durch die automatische 1 : 20-Verdünnung der Probe vor der Injektion wird die Matrixbelastung der Säulen auf ein Minimum reduziert. Dies bewirkt eine lange Lebensdauer der drei HPLC-Säulen, die in Reihe geschaltet sind. Zuerst dient eine „Chromolith® RP-18 endcapped 5-4.6 mm (Merck)“-Vorsäule dazu, Restpartikel und Matrixbestandteile von den eigentlichen Trennsäulen fernzuhalten. Ein Merkmal dieser Vorsäule ist die hohe Porosität des Trägermaterials, so dass kaum Rückdruck erzeugt wird.

Als zweite Säule kommt eine „Sequant® ZIC™-HILIC 50-4.6 (3.5 µm), 200 Å (Merck)“ zum Einsatz, die es durch ihre Zwitterionenstruktur ermöglicht, das sehr polare Taurin im Chromatogramm so zu verzögern, dass es von den Zuckern getrennt wird und als letzter Peak im Chromatogramm eluiert (s.  Bild 2).