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Dr. Ulrike Gast ist Applikationsspezialistin für manuelle Dosiersysteme und deren Kalibrierung. © Eppendorf

Dr. Gast: Ja, das Angebot von Schulungen, nicht nur von Eppendorf, ist wirklich wichtig. Wenn ich sehe, welche Empfehlungen, Tipps und Tricks manchmal im Internet kursieren, graust es mich. Da ist es gut, wenn das in den Schulungen wieder geradegerückt werden kann. Eine wichtige Erkenntnis aus unseren Trainings ist, dass Fehler nicht nur während der Dosierung entstehen, sondern bereits davor. Nämlich bei der – meist nicht erfolgten – Wahl des geeigneten Dosiersystems. So gibt es beispielsweise eine ganze Reihe von Flüssigkeiten, die mit üblichen Luftpolsterpipetten nur unzureichend beherrscht werden können. Ein anderes Beispiel: Ich würde keine Serien von 40 Tubes mit einer Luftpolsterpipette befüllen wollen, wenn jeweils dieselbe Flüssigkeit dosiert wird. Das ist viel zu anstrengend. In beiden Fällen macht ein Direktverdränger mit Dispensierfunktion wie die Multipette Sinn. Man sollte also erst über das System nachdenken und dann zu dem greifen, das am besten für die jeweilige Aufgabe geeignet ist. Die genannten Beispiele zeigen, dass es dabei nicht reicht, nur einen möglichst kleinen Pipettierfehler im Blick zu haben. Auch Ergonomie und Effizienz der Durchführung sind wichtig. Wenn ich einen müden Arm habe, kann ich auch keine guten Pipettier-Ergebnisse erzielen.

Werfen wir einen Blick auf die typischen Handhabungsfehler mit Luftpolsterpipetten, den Arbeitspferden im Labor. Bei Luftpolsterpipetten wird häufig mit zu großem Luftpolster gearbeitet, die Pipette während der Flüssigkeitsaufnahme schräg gehalten und der Flüssigkeit ungenügend Zeit eingeräumt, in die Spitze zu gelangen. Auch der Einfluss von Pipettenspitzen auf das Dosierergebnis ist oft nicht bekannt. Ich empfehle in unseren Schulungen, grundsätzlich möglichst dicht am Nennvolumen zu arbeiten, dann ist der Pipettierfehler generell am geringsten, weil das Luftpolster am kleinsten ist.

Wie sieht ein korrekter Pipettiervorgang aus? Haben Sie Tipps für unsere Leser?

Klar habe ich Tipps – über dieses Thema könnte ich lange berichten, fokussiere mich hier aber auf die „Big Five“ der Flüssigkeitsaufnahme mit Luftpolsterpipetten und den wichtigsten Punkt bei der Abgabe:

Schritt 1: Nehmen Sie sich Zeit – Pipettieren und Hektik vertragen sich nicht!

Schritt 2: Prüfen Sie, welches Dosiersystem für Ihre Anwendung geeignet ist.

Schritt 3: Achten Sie darauf, stets nahe des Nennvolumens zu arbeiten.

Schritt 4: Halten Sie die Pipette bei der Aufnahme von Flüssigkeit senkrecht. Das gilt übrigens und ganz besonders auch für die Mehrkanalpipetten, die während der Flüssigkeitsaufnahme aus dem Reservoir gern schräg gehalten werden!

Schritt 5: Warten Sie kurz, bis Sie die Spitze aus der Flüssigkeit ziehen. Ich empfehle, bei kleinen Volumina von 20 bis 23 zu zählen, bei großen bis 25, bevor die Spitze aus der Flüssigkeit gezogen wird. Es braucht Zeit, bis das ganze Volumen das kleine Loch der Spitze passiert hat.

Bei der Flüssigkeitsabgabe sind weniger Einzelfaktoren zu beachten. Jedoch ist hier ganz wichtig, dass der Bedienknopf wirklich so lange gedrückt gehalten wird, bis die Spitze die Flüssigkeit verlassen hat. Viel Routine führt oft zu einem Verschmelzen der Einzelschritte „Herausziehen“ und „Bedienknopf zurückgleiten lassen“ zu einer Bewegung. Dabei wird dann leicht versehentlich wieder etwas Flüssigkeit aus dem Zielgefäß in die Spitze gesogen – Flüssigkeit, die dem finalen Volumen dann fehlt. In unseren Schulungen bieten wir übrigens einen Schnelltest an, mit dem jeder Teilnehmer das eigene Pipettier-Geschick überprüfen kann. Der Test hilft dabei, das Pipettieren richtig zu erlernen, weil man sofort ein mit bloßem Auge sichtbares Feedback bekommt.