Festphasen-Extraktion (Solid-Phase Extraction – SPE) ist eine effektive Vorbereitungsmethode, um Proben vor der HPLC Analyse aufzukonzentrieren. Klassischerweise wird diese Methode offline (d.h. separat vom HPLC System) in zeitaufwändigen Einzelschritten manuell vollzogen. Die Vorteile der online-Kopplung sind eine verkürzte Analysezeit sowie geringere Probenverunreinigungen und – verluste. Damit ist sie hervorragend geeignet für die Konzentrierung von Bisphenol A (BPA) in Proben mit sehr geringer Konzentration wie z.B. Trinkwasser. Es ist bekannt, dass BPA selbst in geringen Mengen als endokriner Stoff mit ähnlichen Effekten wie Östrogen mit Umwelt- und Gesundheitsproblem in Verbindung gebracht werden kann. Aus verschiedenen Studien geht hervor, dass ein maximaler Eintrag von <1 µg/ml in kaltem Trinkwasser erwartet werden kann. In erwärmtem Wasser (70 °C) ist eine Konzentration von bis zu 30 µg/ml möglich. Daher ist eine schnelle HPLC Methode mit sehr geringen Nachweisgrenzen für BPA notwendig.

Herstellung der Standardlösungen
Alle Standards wurden mit Wasser in LC-MS Qualität hergestellt und verdünnt, um Matrixeffekte während der Kalibrierung zu verhindern und um eine gleichbleibende Qualität des Standards zu gewährleisten. 

Analytische HPLC Methodenparameter

SPE Methodenparameter

Ergebnisse
Nach der mit direkter Injektion durchgeführten Kalibrierung wird in einem zweiten Schritt die online SPE Säule in das System integriert. Konzentrationen bis zu 0.07 ng/ml konnten aus vorbereiteten Wasserproben mit konstanter Extraktionszeit bestimmt werden. Danach wurde eine Lösung mit gleichbleibender Konzentration von 0.1 ng/ml mit unterschiedlichen Extraktionszeiten vermessen. Es wurde eine Wiederfindungsrate von 98 % für BPA ermittelt.

Darstellung der Systemkomponenten des HPLC Systems mit online SPE Modul.

Zusammenfassung
Die vorgestellte Methode ist gut geeignet für die Analyse von BPA in Wasserproben wie Trinkwasser. Um eine noch geringere Nachweisgrenze zu erreichen kann die Extraktionszeit über die SPE Säule erhöht werden. Mit dieser empfindlichen Methode ist es möglich, eine quantitative Aussage für niedrig konzentrierte Proben und Extrakte abzugeben, ohne zeitaufwändige manuelle Probenvorbereitung einsetzen zu müssen.