HPLC-Tipp
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    Der HPLC-Tipp

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Der HPLC-Tipp

„Achte auf deine Gedanken, denn sie werden deine Worte.

Achte auf deine Worte, denn sie werden deine Taten.

Achte auf deine Taten, denn sie werden dein Charakter.

Achte auf deinen Charakter, denn er wird dein Schicksal.

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Der HPLC-Tipp

Die Retentionszeit bleibt konstant – ist somit auch der Fluss automatisch okay?


Der Fall
Sie stellen fest, dass bei WiederhoIinjektionen einer Probe die Retentionszeit konstant bleibt. Bedeutet dies, dass alle Faktoren, die die Retentionszeit beeinflussen können, also – neben Temperatur, Eluent und stationärer Phase – auch der Fluss, in Ordnung sind?

Die Lösung
Bei den drei Erstgenannten zweifelsohne, beim Fluss nicht unbedingt.

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Der HPLC-Tipp

Wir haben uns bereits an dieser Stelle über den Einfluss der Probenlösung auf die Peakform und somit auf die Trennung unterhalten. So führt ein zu starkes Probenlösungsmittel (Probe z.B. in mehr MeOH oder ACN im Vergleich zum Eluenten)mehr...
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Empfehlungen in Geräte-Handbüchern – seien Sie etwas vorsichtig!
Der Fall
Handbücher von Geräteherstellern sind meist sehr nützlich – zwar manchmal viel zu umfangreich und von Softwarespezialisten statt von Analytikern verfasst, aber dennoch: Manches wird erst nach deren Lektüre wirklich klar.

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Heute werden wir uns mit den Eluenten im weitesten Sinne beschäftigen.

Mikroorganismen

  • In MeOH/H2O/H3PO4-Gemischen können Algen recht schnell wachsen, ist dagegen ACN als organisches Lösungsmittel zugegen, passiert dies kaum
  • In H2O/Essigsäure bzw.
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Liebe HPLC-Anwenderinnen, liebe HPLC-Anwender,
wie auch in den letzten Jahren werden wir uns in den Monaten Juni bis August kleinen, leicht zu verdauenden HPLC-Tipps widmen. Heute geht es um Probleme, die direkt oder indirekt mit dem Lösungsmittel Acetonitril zu tun haben.

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Seit einigen Jahren existieren bereits auf dem Markt Systeme, die Trennungen bei Drücken von bis zu 1000 bar erlauben (z.B. Jasco, Waters, Knauer).mehr...

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Die Chromatogramme „erzählen“ viel – man sollte sich nur die Zeit nehmen, sie etwas bewusst anzuschauen. Das sei nachfolgend anhand der abgebildeten Chromatogramme demonstriert. Dieses Beispiel stammt von der Arbeitsgruppe Prof. Engelhardt, Saarbrücken.mehr...

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Im Februar-Tipp haben wir uns mit physikalisch/chemischen Ursachen beschäftigt, die beim Methodentransfer zu unterschiedlichen Flächen (und somit zu unterschiedlichen Gehalten) führen – trotz technisch einwandfreier Hardware.mehr...

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Der Fall
In nahezu jedem Regelwerk wird „expressis verbis“ vermerkt, dass die Auswertung sowohl über die Peakfläche als auch über die Peakhöhe erfolgen kann. Dennoch hat sich in der Praxis bis auf wenige Ausnahmen die Auswertung über die Peakfläche etabliert.

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Die Säule meldet sich zu Wort...

Liebe HPLC-Anwenderinnen, liebe HPLC-Anwender, es weihnachtet... Lassen Sie uns auf eine etwas unkonventionelle Art und Weise ein paar Vorsichtsmaßnahmen wiederholen, die zur merklichen Verlängerung der Lebensdauer einer RP-Säule führen – die Säule meldet sich heute selbst zu Wort und bekundet auf ihre typisch unbekümmerte Art ihre Wünsche.

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Eine/mehrere polare Komponente(n) eluiert(en) direkt an der Totzeit – was tun? Der Fall
Nehmen wir an, Sie können Ihre viele mehr oder weniger apolare Komponenten recht gut trennen. Nur eine oder zwei Komponente(n) bereitet(n) Ihnen Kopfzerbrechen: Jene polare eluiert(en) direkt beim Totzeitpeak bzw. an der Flanke des an der Totzeit eluierenden polaren „Drecks“.mehr...

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Wie aussagekräftig ist die Angabe „X% C“ bei einer RP-Phase? von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken Der Fall
Man findet bei den Angaben zu den physikalisch-chemischen Eigenschaften von RP-stationären Phasen in Datenblättern von Herstellern u.

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Ursachen für Drift

Der Fall
Drift ist je nachdem zwischen lediglich störend und äußerst ärgerlich. Wann ist nun mit Drift zu rechnen?

Die Lösung
Nachfolgend werden die häufigsten Ursachen genannt:

Isokratische Trennungen:

  • Die Temperatur ist nicht konstant.
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Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken Besteht Bedarf, das Rauschen zu minimieren (Hinweis von Hans-Joachim Kuss, LMU, München)

Man braucht dazu zunächst nur ausrechnen, wie hoch das Rauschen ist. Je nach Anforderung kann anschließend entschieden werden, ob aktuell Handlungsbedarf besteht oder eben nicht.

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Die „Kleinen“ im Juli
Alternativen zu Phosphor- und Trifluoressigsäure

Bekanntlich werden für den stark sauren Bereich (pH-Wert um 2…2,5) gerne H3PO4 oder TFA verwendet. Der pH-Wert wird häufig nicht eingestellt, auch auf die Verwendung von Puffern wird verzichtet: Eine mögliche kleine Verschiebung des pH-Wertes ist in diesem recht sauren Bereich nicht tragisch, eine merkliche Verschiebung der Retentionszeit wird selten beobachtet.

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Sollte sich abzeichnen, dass der Sommer anno 2007 noch heißer wird als der Frühling, werde ich meine Bekannten aus Griechenland für eine Weile nach Deutschland einladen: Sie sollen sich hier an heiße Temperaturen gewöhnen, bevor sie dann zu Hause Urlaub machen können…

Wie auch immer, gönnen wir uns in den Monaten Juni bis August passend zur Jahreszeit leichtbekömmliche, kleine HPLC-Tipps.

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