Schnelle Methodenentwicklung in der RP-HPLC
Der Fall
Sie müssen eine Methode schnell entwickeln und Sie haben wenig Zeit. Selbstverständlich verfügen Sie über eine moderne Gradientenanlage und über ein ansehnliches Säulen-Portfolio.
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Der Fall
Nehmen wir an, die beste Selektivität erzielen Sie bei einem pH-Wert von ca. 1,5…2 bzw. 9…10. Ihre Säule ist in diesem Fall in der Regel nicht sonderlich begeistert: Im Saueren besteht die Gefahr der Abspaltung der funktionellen Gruppe(n) durch Hydrolyse („Bluten“ der Säule) – jene Gefahr ist um so größer, je kürzer/polarer die funktionelle(n) Gruppe(n) ist/sind.
mehr...Aktuelle TOP 5
Der Fall
Seit ca. zwei Jahren gibt es bereits den neuen Detektor CAD Corona (Corona Aerosol Detektor) auf dem Markt und es existieren nun fundierte Erfahrungen aus seinem Einsatz.
mehr... Sind hydrophobe oder polare Wechselwirkungen für meine Trennung notwendig?
Der Fall
Bekanntlich können in der HPLC, je nach Analyt und chromatographische Bedingungen, hydrophobe Wechselwirkungen dominieren oder aber es liegt ein Mischmechanismus vor.
mehr...Liebe Kolleginnen, liebe Kollegen,
im Dezember haben Sie an dieser Stelle ein Kreuzworträtsel zur Entspannung am Jahresende gefunden. Vielleicht haben Sie sich der kleinen Herausforderung angenommen. Wie auch immer – nachfolgend finden Sie die Lösung.
mehr...Liebe Kolleginnen, liebe Kollegen,
in den letzten Jahren habe ich Sie an dieser Stelle im Dezember mit HPLC-Märchen, Spielchen, Glossen usw. verwöhnt. Ich dachte, dieses Jahr sollten wir es vielleicht doch mal wieder etwas sportlich zugehen lassen: Sie können, wenn Sie mögen, sich mit folgendem Kreuzworträtsel beschäftigen, das nicht nur, aber auch HPLC-Begriffe enthält.
mehr... Wie kann die Qualität von HPLC-Wasser überprüft werden und wie macht sie sich in der HPLC bemerkbar?
Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken
Der Fall
Üblicherweise wird in der HPLC entweder vor Ort aufbereitetes Wasser (z.
mehr...Bekanntlich gibt es Substanzen, die äußerst hartnäckig an allerlei Oberflächen „kleben“ bleiben.
mehr...Wie aussagekräftig sind Bodenzahlen?
Der Fall
Die Bodenzahl ist bekanntlich u.a. ein Maß für die Effizienz (Packungsqualität) einer Säule. Selbstverständlich indirekt auch für die Güte der verwendeten Apparatur, weil ja letztere durch ihr Totvolumen auch zur Bandenverbreiterung beiträgt.
mehr...Die „kleinen“ Juli-Tipps
Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken
Heute wollen wir uns zum einen mit dem Behältnis und zum anderen mit der Peakfläche beschäftigen.
Probleme mit dem Behältnis
•Proteine – aber auch andere Moleküle – können an Polyethylenoberflächen sorbiert werden, deswegen sollten Polypropylen- oder Glasgefäße verwendet werden.
mehr...„It´s summer time...“
von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken
Liebe HPLC-Mitstreiterinnen und -Mitstreiter,
vielleicht kennen Sie ja unsere kleine Tradition: Im Sommer wollen wir uns nur leichte „Kost“ gönnen und beschäftigen uns deswegen von Juni bis August mit kurzen, „leichtbekömmlichen“ HPLC-Tipps.
mehr...Fassen Sie Ihre HPLC-Anlage ruhig an...
Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken
Der Fall
Häufig haben AnfängerInnen vor dem Gerät einen unnötig hohen Respekt oder gar Suspekt. Es wird bei Bedarf lediglich die Säule vorsichtig ausgetauscht, sonst wird nichts angefasst – man weiß ja nie.
mehr...Kleine Änderungen – große Wirkung
Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken
Der Fall
Im Dezemberheft haben wir uns spaßeshalber folgenden Fall vorgestellt: Sie sollten sich überlegen, welche kleinen („bösen“) Änderungen methodischer und/ oder apparativer Natur Sie bewusst vornehmen könnten, Änderungen, die eine große Auswirkung zum Beispiel im Chromatogramm (Retentionszeit, Peakform, Peakhöhe, Basislinie usw.
mehr...Doppelpeaks
von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken
Der Fall
Während eines Laufs bei einer mehr oder weniger bekannten Applikation stellen Sie auf einmal Doppelpeaks fest. Was könnte die Ursache sein?
Die Lösung
Um es vorweg klar zu stellen: Hier sind keine zusätzliche Peaks gemeint, deren Ursprung Luft, Memory-Effekt, allerlei Kontaminationen usw.
mehr...Legale Tricks, um eine geforderte Bodenzahl doch noch zu erreichen
Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken
Der Fall
Nehmen wir an, dass eine der Forderungen in der PV einer Routine-Methode lautet: „Bodenzahl für Peak X mindestens 5000“.
mehr...Eine ungewöhnliche Wette...
Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken
Also wissen Sie, liebe Leser, der alte Albert, der hat wahrscheinlich schon ein bisschen Recht mit seiner Relativitätstheorie – sagen jedenfalls gescheite Menschen, die diese Sachen verstanden haben.
mehr...Der pH-Wert in Probenlösungen bestehend aus Methanol/Wasser
von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken
Der Fall
Im Juli haben wir uns über das Driften des pH-Wertes ins Alkalische nach der Zugabe von einem organischen Lösungsmittel in einen sauer/wässrigen Eluenten unterhalten.
mehr...Einige Ursachen für negative Peaks
Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken
Der Fall
Negative Peaks stellen eine ärgerliche Sache dar, die bei einigen Applikationen stets zu beklagen ist, oder aber sie tauchen immer wieder völlig unberrechenbar auf.
mehr...Kleine Tipps zur Fehlersuche und Robustheit III
Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken
•Empfehlung: Wenn irgendwie möglich sollte man als Lösungsmittel für die Probe kein reines Wasser oder Puffer verwenden, ein Zusatz von 5 oder 8 % Acetonitril oder Isopropanol wären angebracht.
mehr...Kleine Tipps zur Fehlersuche und Robustheit II
Von Dr. Stavros Kromidas, Saarbrücken
•Wir haben uns bereits über folgenden Trick unterhalten (s. Tipp Nr. 37 in: Stavros Kromidas „HPLC-Tipps Band 2“: Im niedrigen Wellenlängen-Bereich haben wir bei einem Wasser/Acetonitril-Gradienten häufig mit einer störenden Drift zu kämpfen, weil eine große UV-Differenz zwischen Wasser und Acetonitril herrscht und genau jene wird ja vom UV-Detektor registriert.
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